产品货号:
JN0048
中文名称:
2×BloTaq PCR MasterMix
英文名称:
2×BloTaq Master Mix
产品规格:
1ml|5mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是将PCR反应所需的BloTaq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2×的混合物,专为常规PCR扩增反应优化。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1×即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程的污染。2×BloTaq MasterMix提供普通型/快速上样型两种形式供您选择。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。
BloTaq DNA聚合酶是截短后的Taq DNA聚合酶,它缺失了5'→3'外切酶活性。BloTaq DNA聚合酶还存在其它突变,这些突变使它能够耐受全血样品中存在的抑制剂。该酶能够扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先提纯,在25μL反应体系中能够耐受高达10%的全血。在大多数抗凝剂存在下,包括肝素、柠檬酸和EDTA等,BloTaq DNA聚合酶依然扩增性能良好。
- 未加抗凝剂的血液样本;
- 添加了肝素、柠檬酸、EDTA等抗凝剂的血样样本;
- 血液基因组扩增检测。
- 简便:直接用血液为模板扩增目的基因,无需事先提纯。
- 高效:多数抗凝剂存在条件下,抗抑制能力强,能有效扩增。
- 稳定:经测试,反复冻融40次后,扩增性能仍不受影响。
组分 | 1mL | 5mL |
2×BloTaq PCR MasterMix | 1mL | 5×1mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
建议使用时添加≤10%的全血为模板,加上血液后将管中各组分轻轻混匀。
- 为了自身安全,操作过程需戴手套,口罩。
- 用于血液样品的扩增,不建议用于常规模板扩增。
图例一:以人全血样品(含EDTA抗凝剂)为模板,加入不同血液量进行扩增。
泳道1:10%全血;
泳道2:5%全血;
泳道3:2%全血;
泳道4:0%全血;
泳道M:DNA Ladder 2000。
- 常用反应体系
注:Mg2+终浓度为2mM。成分 用量 2×BloTaq PCR MasterMix 12.5μL 上游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 全血 0.1~2.5μL ddH2O 至25μL - 推荐PCR反应程序
- 当扩增片段<3K:
循环数 温度 时间 1 94℃ 90s 30 94℃ 20s 50~60℃ 20s 72℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温 - 当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
循环数 温度 时间 1 94℃ 5min 30 94℃ 5s 68℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温
- 当扩增片段<3K:
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